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NLRP3 炎症小体对大鼠心肌细胞 H9C2 钙化的影响
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R542.2+2

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江西省卫健委立项课题


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    目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(NLRP3)炎症小体对大鼠心肌细胞 H9C2 钙化的调控作用。方法 采 用 10 mmol/L 的 β- 甘油磷酸钠培养 10 d,诱导心肌细胞钙化模型。具体分组为:空白对照组、钙化模型组、模型 +NLRP3 抑制剂组。其 中模型 + NLRP3 抑制剂组为造模前采用 10 μM NLRP3-IN-2 预处理细胞,并于 24 h 后再采用 β- 甘油磷酸钠诱导。采用 Von kossa 染色观 察各组心肌细胞钙化情况;生化试剂盒检测细胞上清中碱性磷酸酶(ALP)活性;流式检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量 PCR 实验 (qPCR)检测各组细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶 1(caspase-1)、骨形态发生蛋白 -2(BMP-2)、Runt 相关转录因子 2(Runx2)mRNA 的表达情况。结果 与空白对照组相比,模型组可见颗粒状沉积物分布在细胞周围,ALP 活性水平显著上升,细胞凋 亡水平显著上升,ASC、caspase-1、BMP-2、Runx2 mRNA 表达水平显著上升;与模型组相比,模型 +NLRP3 抑制剂组中细胞钙沉积情况 显著减轻,ALP 活性水平显著下调,细胞凋亡水平显著下降,ASC、caspase-1、BMP-2、Runx2 mRNA 表达水平显著下降。结论 10μM NLRP3-IN-2 可以抑制心肌细胞钙化模型,其作用可能与抑制 ASC/Caspase-1 通路、抑制 ALP 活性、抑制细胞凋亡有关。

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  • 在线发布日期: 2023-08-03
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